Widal,Weil-Felix Test

posted on 14 Jun 2010 11:21 by mindsoul

ดัดแปลงจากเอกสารประกอบการสอนวิชาพยาธิวิยาคลินิก เรื่อง
"การตรวจทางซีโรโลยีเพื่อวินิจฉัยโรค (Serodiagnosis for infactious disease)"
โดย ผศ.พญ.สุดารัตน์ ปิโยพีระพงศ์

(เอกสารของ Clinical pathology ตอน ปี 3)

การตรวจทางซีโรโลยีโดย Widal test

หลักการ Widal test เป็นการตรวจหา Antibody ต่อ O antigen (Somatic antigen)
และ H antigen (Flagella antigen) ของเชื้อ Salmonella Group A, B, C, D
โดยอาศัยปฏิกิริยาการจับกลุ่ม (Agglutination test) โดยเมื่อ Antigen ทำปฏิกิริยากับ Antibody
ใน Serum จะเห็นการจับกลุ่มของตัวเชื้อ และรายงานผลเป็น Titer

user posted image

- O antigen เป็นส่วนที่อยู่ในผนังเซลล์ ส่วน Lipopolysacharide เป็น Somatic antigen
มีคุณสมบัติทนต่อความร้อน ส่วนใหญ่เป็น IgM class จะเริ่มขึ้นใน ปลายสัปดาห์แรกของโรค
และสูงสุดในสัปดาห์ที่ 3-4 และอยู่นานเป็นเวลาหลายเดือน หรืออาจจะเป็นปี
...O antigen สามารถเกิด cross reaction ระหว่าง Salmonella กลุ่มต่างๆได้ เนื่องจากมี
Antigen ร่วมกัน ดังตารางข้างต้น
...ตัวอย่างเช่น S. typhi ซึ่งก่อโรค Typhoid fever มี O antigen 9, 12
.................S. typhimurium ซึ่งก่อโรค gastroenteritis มี O antigen 1, 4, 12
...จะเห็นว่า มี O antigen 12 ร่วมกัน ดังนั้น การมี O antigen positive อาจจะเป็น
Gastroenteritis หรือ typhoid ก็ได้ ดังนั้น การแปลผลต้องควบคู่ไปกับ Clinical และ H antigen

- H antigen เป็นส่วนที่อยู่ที่ Flagella ของเชื้อ มีคุณสมบัติถูกทำลายได้ด้วยความร้อน แอลกอฮอล์
ส่วนใหญ่เป็น IgG class จะเริ่มมี Antibody ขึ้นในปลายสัปดาห์ที่ 2 สูงสุดที่สัปดาห์ที่ 4-6 และอยู่
ได้นานเป็นปี

การแปลผล Widal test

(1) การตรวจพบ Four-fold rising ของ Antibody โดยตรวจเลือด 2 ครั้งห่างกัน 7 - 10 วัน
(acute และ convalescent serum) เป็นข้อบ่งชี้ว่าอยู่ในระยะเป็นโรค

(2) ถ้าหากตรวจเลือดเพียงครั้งเดียว จะใช้วิธีดูว่า ระดับ Titer สูงกว่า เกณฑ์ Positive หรือไม่
ซึ่งแตกต่างกันในแต่ละห้อง Lab โดยที่ห้องปฏิบัติการของ โรงพยาบาลศิริราชมีรายงานว่า
Sensitivity 55 % และ Specificity 78 % (Cut off titer: O antibody 1:160 , H antibody 1:100)
รายงานของห้องปฏิบัติการอื่นๆ พบ Sensitivity อยู่ในช่วง 46 - 94%

False positive ของ Typhoid เมื่อตรวจด้วย Widal test พบได้ใน
...(1) Autoimmune disease เช่น Rheumatoid arthritis, SLE
...(2) เคยได้รับวัคซีนทฟอยด์หรือเคยติดเชื้อไทฟอยด์มาก่อน
...(3) โรคที่เกิดจาก Group D Salmonella หรือ Gram-negative bacteria อื่นๆ
...(4) Chronic liver disease

False negative ของ Typhoid เมื่อตรวจด้วย Widal test พบได้ใน
...(1) ในระยะสัปดาห์แรกของโรค
...(2) ภาวะทุพโภชนาการ
...(3) ผู้ป่วยได้รับยาปฏิชีวนะมาก่อน
...(4) ได้รับยากดภูมิคุ้มกัน

การตรวจทางซีโรโลยี โดย Weil-Felix test

ใช้ในการตรวจ Rickettsial disease
เป็นการตรวจหา nonspecific antibodies ต่อ Proteus strains โดยวิธี Agglutination
เนื่องจากเชื้อ Rickettsia มี common antigen ร่วมกับ Proteus

หลักการ ตรวจหา Antibody โดยใช้ Antigen จาก Proteus vulgaris OX-19, OX-2
และ Proteus mirabilis OX-K
เนื่องจาก มี Cross reactive epitope กับ Rickettsia

การแปลผล Weil-Felix Test

(1) Scrub typhus OX-19: negative / OX-2: negative / OX-K : positive
.....Murine typhus OX-19: positive / OX-2: negative / OX-K : negative

(2) ระดับของ Proteus OX-K antibody จะเริ่มตรวจพบราวปลายสัปดาห์ที่ 2 หลังจากมีไข้และสูงสุด สัปดาห์ที่ 3-4

(3) ควรส่งตรวจเลือด 2 ครั้ง (acute และ convalescent serum) เพื่อดูว่ามี Four-fold rising
.....หรือไม่ ซึ่งมีความสำคัญในการวินิจฉัยโรคมากกว่าการตรวจเลือดครั้งเดียว

(4) กรณีส่งตรวจเลือดครั้งเดียว
.....OX-K > 1:160 - 1:320 ถือว่าผล Positive
.....โดย Cut-off titer 1:160 จะมี Sensitivity 52% ,Specificity 93.3%
.....และ Cut-off titer 1:320 จะมี Sensitivity 33% ,Specificity 97%

(5) False positive
.....5.1) Leptospirosis
.....5.2) Brucellosis
.....5.3) Urinary tract bacterial infection
.....5.4) Severe hepatic or biliary diasease
.....5.5) malaria

(6) False negative
.....6.1) ผู้ป่วยที่ได้รับยาปฏิชีวนะมาก่อน
.....6.2) ระยะ 1-2 สัปดาห์แรกของโรค


การตรวจ-เก็บ DNA,RNA,Virus

posted on 14 Jun 2010 11:16 by mindsoul

 

 

ติดต่อ             หน่วยไวรัสวิทยาและจุลชีววิทยาโมเลกุล ภาควิชาพยาธิวิทยา                       

                       คณะแพทยศาสตร์ ร.พ. รามาธิบดี มหาวิทยาลัยมหิดล
โทรศัพท์ : 201-1324, 201-1470, 201-2115
 
โทรสาร     : 201-1324, 201-1470
E-mail    : rawct@mahidol.ac.th
Website : http://www.virusrama.org/
 

การตรวจวินิจฉัย DNA/RNA ของไวรัสจากสิ่งส่งตรวจด้วยเทคนิค PCR/RT-PCR และ Branch  DNA Hybridization

 

      

 สิ่งส่งตรวจ Cobas Amplicor      bDNA
ชนิดไวรัส สิ่งส่งตรวจ Qualitative Viral load Viral load

CMV

EDTA Blood 5ml, CSF, Urine, BAL,เชลล์, ชิ้นเนื้อ ได้ผลใน 1-3 วัน*EDTA Blood ได้ผลใน 1-3 วัน*EDTA Blood  
HCV
EDTA Blood 5ml ได้ผลใน 1-3 วัน ได้ผลใน 1-3 วัน ได้ผลใน  1 สัปดาห์
HBV
EDTA Blood 5ml   ได้ผลใน 1-3 วัน ได้ผลใน 1 สัปดาห์
HIV EDTA Blood 5ml,เซลล์ ได้ผลใน 1-3 วันตรวจ viral RNA ได้ผลใน 1-3 วันตรวจ viral RNA

โปรดระบุวิธีตรวจ

 *   Standardค่าต่ำสุด 400 copies/ml

 Ultrasensitive ค่าต่ำสุด 50 copies/ml
 
ชนิดไวรัส สิ่งส่งตรวจ Sequence based genotyping การนำไปประยุกต์ใช้
HIVFDA approved EDTA Blood 5ml โปรดเลือก

  RT

  Protease RT + Protease

หมายเหตุ

*       HIV-1 ที่ส่งมาตรวจ genotyping ควรมี viral load > 2,000 copies/ml *       กรณีที่ตรวจ genotype ไม่ได้จะทำการตรวจ viral load ชดเชย
Drug resistance assay

HCV

EDTA Blood 5ml 5’ Non Coding Genotypingแสดงผลได้ทุก type & subtype

หมายเหตุ

*       HCV ที่ส่งมาตรวจ genotyping ควรมี  viral load > 2,000 copies/ml *       กรณีที่ตรวจ genotype ไม่ได้จะทำการตรวจ viral load ชดเชย
Drug resistance assay

HBV

EDTA Blood 5ml

แสดงผลการกลายพันธุ์ที่ตำแหน่งต่างๆ

Drug resistance assay

HPV

เชลล์, ชิ้นเนื้อ L1  regionแสดงผลได้ทุก type & subtype Disease management
การตรวจวินิจฉัย DNA/RNA ของไวรัสจากสิ่งส่งตรวจด้วยเทคนิค Real-Time PCR
 
  สิ่งส่งรวจ Super Speed, Real-Time PCR (LightCycler)
ชนิดไวรัส สิ่งส่งตรวจ Qualitative Typing Viral load

HSV

EDTA Blood 5ml, CSF, BAL, Vaginal Swab, Vitreous Fluids (น้ำจากตา) ได้ผลใน 24 ช.ม.แสดงผล + หรือ พร้อมทั้งTyping (บ่งชี้ Type 1 หรือ  2) ได้ผลใน 24 ช.ม.

CMV

EDTA Blood 5ml, CSF, Urine, BAL,เชลล์, ชิ้นเนื้อ ได้ผลใน 1-2 วัน*CSF, Urine, BAL   ได้ผลใน 1-2 วัน*CSF, Urine, BAL

EBV

EDTA Blood 5ml,เชลล์, ชิ้นเนื้อl ได้ผลใน 1-2 วัน   ได้ผลใน 1-2 วัน

VZV

EDTA Blood 5ml, CSF, Vesicles ได้ผลใน 1-2 วัน    

Dengue

EDTA Blood 5ml ได้ผลใน 1-2 วัน

Type 1,2,3,4

ได้ผลใน 1-2 วัน
 
HCV
EDTA Blood 5ml      
HBV
EDTA Blood 5ml ได้ผลใน 1-2 วัน    
HIV EDTA Blood 5ml,เซลล์ ได้ผลใน 1-3 วันตรวจ proviral DNA จาก PBMC     ได้ผลใน 1-3 วันตรวจ proviral DNA จาก PBMC 
HPV เชลล์, ชิ้นเนื้อ ได้ผลใน 1-2 วันตรวจ wild type ได้ผลใน 1-2 วันโปรดระบุ type ที่ต้องการตรวจ 6/1116/18  31/33/35 ได้ผลใน 1-2 วัน

 

การตรวจวินิจฉัยหาเชื้อ HPV DNA ด้วยเทคนิค Hybrid Capture Technology
 
ชนิดไวรัส สิ่งส่งตรวจ ข้อมูลพื้นฐาน

 

HPV

Cervical Specimen  *       สามารถตรวจหาสายพันธุ์ 16, 18, 31, 33, 35, 45, 51, 52, และ 56 ของ HPV  Virus ซึ่งเป็นชนิดกลุ่มเสี่ยงที่มีโอกาสพัฒนาการเป็นมะเร็งปากมดลูกได้  
 
การเก็บตัวอย่างส่งตรวจ PCR & Genotype assay
 

1.    การตรวจหา Viral Load และPCR ใช้ EDTA blood 5 ml หรือ ACD  (ห้ามใช้ heparin ) ส่งห้องแล็บเร็วที่สุด ถ้าไม่สามารถจัดส่งเลือดตามกำหนด ให้ปั่นแยก plasma 1,500 rpm 10 นาที เก็บ plasma โดย Sterile Technique แล้วแช่แข็งที่อุณหภูมิ 20 หรือ -70C นำส่งในกระติกบรรจุน้ำแข็ง (2-8oC)  กรณีส่งเลือดจากต่างจังหวัดหากไม่สะดวกที่จะปั่นแยก plasma ให้นำส่ง EDTA blood มาในกระติกบรรจุน้ำแข็ง (2-8 OC) ถึงห้องแล็บภายในเวลาไม่เกิน 6 ชั่วโมง โปรดแจ้งมายังหน่วยฯก่อนนำส่ง

2.    การตรวจหาเชื้อไวรัสโดยวิธี PCR จากตัวอย่างตรวจชนิดอื่นๆ เช่น  Liver, Lymphnode, CSF, urine และน้ำจากส่วนต่างๆของร่างกาย ควรเป็นหลอดใหม่ หรือ ภาชนะที่ผ่านการฆ่าเชื้อแล้ว (sterilization) 3.    ตัวอย่างเลือดเพื่อการตรวจยีโนมไวรัส HIV ที่ดื้อต่อยาต้านไวรัส (Genotyping) ใช้ EDTA blood 10 ml หรือ ACD (ห้ามใช้ heparin )  ส่งห้องแล็บเร็วที่สุด ถ้าไม่สามารถจัดส่งเลือดตามกำหนด เช่น เจาะเลือดนอกเวลาราชการ หรือส่งจากต่างจังหวัด ให้ปั่นแยก plasma 1,500 rpm 10 นาที เก็บที่อุณหภูมิ –20  หรือ -70oC นำส่งในกระติกบรรจุน้ำแข็ง(2-8OC)  โปรดแจ้งมายังหน่วยฯก่อนนำส่ง 

 

 

 

 

edit @ 14 Jun 2010 11:38:21 by banpajan

ภาษาไทยใน Windows 2000

posted on 14 Jun 2010 11:04 by mindsoul
ปัญหา ปุ่มปรับภาษาไทย ใน Windows 2000


ผมเชื่อว่าคงมีอีกหลายๆ ท่านที่ประสบปัญหาในการใช้งาน Windows 2000 เช่นเดียวกับผม นั่นคือ ปุ่มปรับภาษาไทย ไม่สามารถใช้ปุ่ม Grave Accent หรือปุ่มที่มีสัญญลักษณ์ ( ' ) หรือบางคนอาจเรียกว่าเป็นปุ่มตัวหนอน

พยายามเซ็ทอย่างไรก็ไม่ได้สักที พอดีผมได้สอบถามเพื่อนคนหนึ่งชื่อ คุณสุชาติ บวรธรรมจักร ได้ให้ความอนุเคราะห์เล่าถึงเทคนิคในเรื่องนี้ และผมได้ทำตามก็สามารถแก้ไขได้จริง จึงขอขอบคุณมา ณ ที่นี่ด้วย..

    วิธีการกำหนดปุ่มปรับภาษาไทย Grave Accent
  1. คลิกเมนู Start คลิกคำสั่ง Settings เลือก Control Panel
  2. คลิกเลือกไอคอน Regional Options



  3. ที่แท็ป General ในช่องล่างที่ชื่อว่า Language Settings for the system ให้คลิกช่อง Thai ให้มีเครื่องหมายถูก
  4. จากนั้นให้คลิกปุ่ม Set Default จะมีหน้าต่างปรากฏ ดังนี้



  5. คลิกเลือก OK จากนั้นกดปุ่ม Apply
  6. จากนั้น restart Windows
  7. หลังจากเข้า Windows ใหม่แล้ว ให้คลิกเข้าไปที่ Control Panel และ Reginal Options
  8. คลิกเลือกแท็ป Input Locales ให้คลิกปุ่ม Change



  9. ในช่องล่าง Install Service ถ้าไม่มีภาษาไทยดังภาพด้านบน ให้คลิกปุ่ม Add เลือกติดตั้งภาษาไทยก่อน
  10. จากนั้นคลิกภาษาไทย เลือก Key Settings
  11. ในช่อง Hot Keys for input languages ให้คลิกเลือกรายการ Switch between input locales



  12. จากนั้นคลิกปุ่ม Change Key Sequence จะได้ดังภาพประกอบ



  13. จะมีช่อง Grave Accent ให้คลิกเลือก คลิกปุ่ม OK
  14. จากนั้นให้ restart Windows ใหม่

คำแนะนำเพิ่มเติม
ถ้าทำผิดขั้นตอน คำสั่งในการใช้ Grave Accent อาจไม่ปรากฏให้เลือกใช้งาน ดังนั้น ให้ลองทำดูใหม่อีกสักครั้ง และสำหรับหน้าต่างที่แสดงข้างบนในแต่ละหัวข้อ อาจมีความแตกต่างกันบ้าง ทั้งนี้อาจเนื่องมาจากการติดตั้งภาษาไทยก่อนหรือหลัง
ที่มา -- IT-Guides.Com

edit @ 14 Jun 2010 11:12:56 by banpajan

edit @ 14 Jun 2010 11:39:29 by banpajan