Widal,Weil-Felix Test

posted on 14 Jun 2010 11:21 by mindsoul

ดัดแปลงจากเอกสารประกอบการสอนวิชาพยาธิวิยาคลินิก เรื่อง
"การตรวจทางซีโรโลยีเพื่อวินิจฉัยโรค (Serodiagnosis for infactious disease)"
โดย ผศ.พญ.สุดารัตน์ ปิโยพีระพงศ์

(เอกสารของ Clinical pathology ตอน ปี 3)

การตรวจทางซีโรโลยีโดย Widal test

หลักการ Widal test เป็นการตรวจหา Antibody ต่อ O antigen (Somatic antigen)
และ H antigen (Flagella antigen) ของเชื้อ Salmonella Group A, B, C, D
โดยอาศัยปฏิกิริยาการจับกลุ่ม (Agglutination test) โดยเมื่อ Antigen ทำปฏิกิริยากับ Antibody
ใน Serum จะเห็นการจับกลุ่มของตัวเชื้อ และรายงานผลเป็น Titer

user posted image

- O antigen เป็นส่วนที่อยู่ในผนังเซลล์ ส่วน Lipopolysacharide เป็น Somatic antigen
มีคุณสมบัติทนต่อความร้อน ส่วนใหญ่เป็น IgM class จะเริ่มขึ้นใน ปลายสัปดาห์แรกของโรค
และสูงสุดในสัปดาห์ที่ 3-4 และอยู่นานเป็นเวลาหลายเดือน หรืออาจจะเป็นปี
...O antigen สามารถเกิด cross reaction ระหว่าง Salmonella กลุ่มต่างๆได้ เนื่องจากมี
Antigen ร่วมกัน ดังตารางข้างต้น
...ตัวอย่างเช่น S. typhi ซึ่งก่อโรค Typhoid fever มี O antigen 9, 12
.................S. typhimurium ซึ่งก่อโรค gastroenteritis มี O antigen 1, 4, 12
...จะเห็นว่า มี O antigen 12 ร่วมกัน ดังนั้น การมี O antigen positive อาจจะเป็น
Gastroenteritis หรือ typhoid ก็ได้ ดังนั้น การแปลผลต้องควบคู่ไปกับ Clinical และ H antigen

- H antigen เป็นส่วนที่อยู่ที่ Flagella ของเชื้อ มีคุณสมบัติถูกทำลายได้ด้วยความร้อน แอลกอฮอล์
ส่วนใหญ่เป็น IgG class จะเริ่มมี Antibody ขึ้นในปลายสัปดาห์ที่ 2 สูงสุดที่สัปดาห์ที่ 4-6 และอยู่
ได้นานเป็นปี

การแปลผล Widal test

(1) การตรวจพบ Four-fold rising ของ Antibody โดยตรวจเลือด 2 ครั้งห่างกัน 7 - 10 วัน
(acute และ convalescent serum) เป็นข้อบ่งชี้ว่าอยู่ในระยะเป็นโรค

(2) ถ้าหากตรวจเลือดเพียงครั้งเดียว จะใช้วิธีดูว่า ระดับ Titer สูงกว่า เกณฑ์ Positive หรือไม่
ซึ่งแตกต่างกันในแต่ละห้อง Lab โดยที่ห้องปฏิบัติการของ โรงพยาบาลศิริราชมีรายงานว่า
Sensitivity 55 % และ Specificity 78 % (Cut off titer: O antibody 1:160 , H antibody 1:100)
รายงานของห้องปฏิบัติการอื่นๆ พบ Sensitivity อยู่ในช่วง 46 - 94%

False positive ของ Typhoid เมื่อตรวจด้วย Widal test พบได้ใน
...(1) Autoimmune disease เช่น Rheumatoid arthritis, SLE
...(2) เคยได้รับวัคซีนทฟอยด์หรือเคยติดเชื้อไทฟอยด์มาก่อน
...(3) โรคที่เกิดจาก Group D Salmonella หรือ Gram-negative bacteria อื่นๆ
...(4) Chronic liver disease

False negative ของ Typhoid เมื่อตรวจด้วย Widal test พบได้ใน
...(1) ในระยะสัปดาห์แรกของโรค
...(2) ภาวะทุพโภชนาการ
...(3) ผู้ป่วยได้รับยาปฏิชีวนะมาก่อน
...(4) ได้รับยากดภูมิคุ้มกัน

การตรวจทางซีโรโลยี โดย Weil-Felix test

ใช้ในการตรวจ Rickettsial disease
เป็นการตรวจหา nonspecific antibodies ต่อ Proteus strains โดยวิธี Agglutination
เนื่องจากเชื้อ Rickettsia มี common antigen ร่วมกับ Proteus

หลักการ ตรวจหา Antibody โดยใช้ Antigen จาก Proteus vulgaris OX-19, OX-2
และ Proteus mirabilis OX-K
เนื่องจาก มี Cross reactive epitope กับ Rickettsia

การแปลผล Weil-Felix Test

(1) Scrub typhus OX-19: negative / OX-2: negative / OX-K : positive
.....Murine typhus OX-19: positive / OX-2: negative / OX-K : negative

(2) ระดับของ Proteus OX-K antibody จะเริ่มตรวจพบราวปลายสัปดาห์ที่ 2 หลังจากมีไข้และสูงสุด สัปดาห์ที่ 3-4

(3) ควรส่งตรวจเลือด 2 ครั้ง (acute และ convalescent serum) เพื่อดูว่ามี Four-fold rising
.....หรือไม่ ซึ่งมีความสำคัญในการวินิจฉัยโรคมากกว่าการตรวจเลือดครั้งเดียว

(4) กรณีส่งตรวจเลือดครั้งเดียว
.....OX-K > 1:160 - 1:320 ถือว่าผล Positive
.....โดย Cut-off titer 1:160 จะมี Sensitivity 52% ,Specificity 93.3%
.....และ Cut-off titer 1:320 จะมี Sensitivity 33% ,Specificity 97%

(5) False positive
.....5.1) Leptospirosis
.....5.2) Brucellosis
.....5.3) Urinary tract bacterial infection
.....5.4) Severe hepatic or biliary diasease
.....5.5) malaria

(6) False negative
.....6.1) ผู้ป่วยที่ได้รับยาปฏิชีวนะมาก่อน
.....6.2) ระยะ 1-2 สัปดาห์แรกของโรค


การตรวจ-เก็บ DNA,RNA,Virus

posted on 14 Jun 2010 11:16 by mindsoul

 

 

ติดต่อ             หน่วยไวรัสวิทยาและจุลชีววิทยาโมเลกุล ภาควิชาพยาธิวิทยา                       

                       คณะแพทยศาสตร์ ร.พ. รามาธิบดี มหาวิทยาลัยมหิดล
โทรศัพท์ : 201-1324, 201-1470, 201-2115
 
โทรสาร     : 201-1324, 201-1470
E-mail    : rawct@mahidol.ac.th
Website : http://www.virusrama.org/
 

การตรวจวินิจฉัย DNA/RNA ของไวรัสจากสิ่งส่งตรวจด้วยเทคนิค PCR/RT-PCR และ Branch  DNA Hybridization

 

      

 สิ่งส่งตรวจ Cobas Amplicor      bDNA
ชนิดไวรัส สิ่งส่งตรวจ Qualitative Viral load Viral load

CMV

EDTA Blood 5ml, CSF, Urine, BAL,เชลล์, ชิ้นเนื้อ ได้ผลใน 1-3 วัน*EDTA Blood ได้ผลใน 1-3 วัน*EDTA Blood  
HCV
EDTA Blood 5ml ได้ผลใน 1-3 วัน ได้ผลใน 1-3 วัน ได้ผลใน  1 สัปดาห์
HBV
EDTA Blood 5ml   ได้ผลใน 1-3 วัน ได้ผลใน 1 สัปดาห์
HIV EDTA Blood 5ml,เซลล์ ได้ผลใน 1-3 วันตรวจ viral RNA ได้ผลใน